类器官Organoids
作为前沿热点技术之一,近年来备受关注。自2018年开始,类器官模型的建立,连续几年被国自然申报指南,列为推荐项目的研究方向。类器官可作为多种疾病的体外模型,在干细胞与发育、再生医学、疾病研究、药物开发和肿瘤治疗等多个领域具有广泛的应用前景。
2000-2022年“类器官”相关发文量(数据来源:pubmed)
类器官模型具有良好的临床前模型潜力,可部分还原细胞在体内的组织和分子特性,与传统精准、再生医学手段相比,类器官能最大程度模拟体内器官,具有一定的组织功能。
迄今为止 ,类器官研究的两个热点,一个为正常干细胞诱导分化构建的类器官,另一个研究热点便是病人来源的类器官(Patient-Derived Oraganoids,PDOs),因为此种方法通常用于肿瘤患者的疾病建模、研究与药物筛选,狭义上又常常被称为肿瘤类器官。
肿瘤组织作为类器官培养的主要供体来源,在采集、运输及保存等过程需要严格规范操作,保持组织的结构及细胞活性是样本运送及保存的基本要求。
肿瘤组织采集、保存及运输现状
1.大部分实验室直接采用常规DMEM或1640培养为保存介质进行组织运输、保存,无法很好地保持组织细胞活性;
2.临床取样后往往无法及时进行实验处理;
3.组织样本的长距离运输。
组织活性保护液优点
1.保护液所有成分对组织和细胞无毒害作用,不影响保存的组织和细胞的生理功能;
2.保护液不含防腐剂和DMSO以及激素成分,避免破坏组织结构及活性;
3.保护液不含血清及动物蛋白;
4.可2-8℃低温运输,保持形态结构和细胞功能活性;
5.确保试剂无细菌、真菌、病毒和支原体污染;
6.质量稳定,批间差异小。
附实验图一
横向为时间,纵向为组织提取出的细胞活率
附实验图二
横向为时间,纵向为组织提取出的细胞活率
注意事项
1.采集的样本需去除多余组织及残留血液,避免对组织样本的干扰;
2.尽量采集较小的组织块,使组织样本完全浸入样本保存液,避免影响组织代谢及营养物质的交换;
3.样本保存液仅适用于组织样本的保存,不适用于单个细胞及血液细胞的保存;
4.不建议液氮和超低温运输标本组织,避免改变组织结构和细胞活性。
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